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Laboratorio di Evoluzione molecolare

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Anno accademico 2007/2008

Codice dell'attività didattica
8011S
Docenti
Prof. Massimiliano Del Pero
Prof. Luisa Lanfranco
Corso di studi
Laurea Magistrale in Evoluzione e Diversità nei Sistemi Naturali (EDEN)
Anno
1° anno
Periodo didattico
Secondo trimestre
Tipologia
Caratterizzante
Crediti/Valenza
5 crediti
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Sommario insegnamento

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Programma

Programma con finalità ed eventuali specifiche per le esercitazioni    L’obiettivo del corso è quello di fornire un’introduzione teorica e pratica alla moderna sistematica molecolare e alle metodologie impiegate nello studio della storia evolutiva dei geni e degli organismi.
Il programma del corso prenderà in esame i seguenti argomenti:
Basi molecolari dell’evoluzione: struttura, funzione e meccanismi evolutivi dei geni, mutazioni delle sequenze di DNA, uso preferenziale di codoni
Cambiamenti evolutivi delle sequenze amminoacidiche, tassi di mutazione e di sostituzione
Cambiamenti evolutivi delle sequenze di DNA: differenze nucleotidiche tra sequenze, stima del numero di sostituzioni nucleotidiche, stima numerica delle distanze evolutive, allineamento delle sequenze nucleotidiche
Sostituzioni nucleotidiche sinonime e non sinonime
Alberi filogenetici: tipi di alberi filogenetici, differenze topologiche e metodi di ricostruzione filogenetica. Metodi di distanza (UPGMA, Neighbor Joining, ecc.), metodi di parsimonia (strategia di ricerca degli alberi di MP, alberi di consenso, pesatura dei caratteri, ecc.), metodi di maximum likelihood (procedure di calcolo, modelli di sostituzione nucleotidica, stima dei parametri di una topologia)
Accuratezza e test statistici degli alberi filogenetici: principi di ottimizzazione e errori topologici (sistematici o stocastici), bootstrap, test delle differenze topologiche, vantaggi e svantaggi dei diversi metodi di ricostruzione filogenetica.
Orologio molecolare e test di tasso relativo
Sequenze nucelotidiche e amminoacidiche ancestrali: metodi di inferenza, evoluzione convergente e parallela
Applicazioni e limiti della sistematica molecolare: scelta della metodologia analitica, analisi combinate
Introduzione all’uso di banche dati molecolari e di software per l’inferenza filogenetica (PAUP, Phylip, MEGA), l’allineamento e l’analisi delle sequenze.
Modalità d’esame    Relazione scritta ed esposizione orale sotto forma di seminario
Presentazione degli argomenti. La dimensione del genoma nei diversi gruppi di
organismi, in particolare funghi e piante. La molecola del DNA negli studi di evoluzione
molecolare. I progetti genoma, il concetto di sintenia. Come si ottengono i dati
molecolari: l'approccio sperimentale e le banche dati.
Lezione teorica su estrazione di DNA genomico, elettroforesi di acidi nucleici, reazione
di PCR (Polymerase Chain Reaction)
Esercitazione: Estrazione di DNA e allestimento di una reazione di PCR con primers
unversali ribosomali.
L'approccio sperimentale: l'importanza del campionamento. Un caso di studio: l'analisi
delle relazioni filogenetiche nelle angiosperme attraverso sequenze di DNA.
Il disegno di oligonucleotidi per le reazioni di PCR. Nested PCR; Multiplex PCR. Esempi
di sequenze di DNA utilizzate negli studi di evoluzione molecolare (i geni ribosomali,
geni codificanti proteine, es. gene leafy). Primers degenerati.
Esercitazioni: Elettroforesi su gel di agaroso dei prodoti di PCR. Utilizzo di programmi
per l'analisi di sequenze e il controllo di oligonucleotidi.
Tecniche per l'analisi dei polimorfismi di DNA basate sulla PCR. PCR-RFLP, SSCP, RAPD,
AFLP.
Consultazione delle banche dati (sito web National Center for Biotechnology
Information) per il recupero di sequenze

Testi consigliati e bibliografia

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Molecular Systematics, Hillis D.M., Moriz C. e Mable B.K. (editors), second edition, Sinauer Associates Inc. 1996
Molecular Evolution and Phylogenetics, Nei M. e Kumar S., Oxford University Press, 2000


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Ultimo aggiornamento: 17/09/2008 07:58
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